摘 要：CAR-T是目前非常热门的治疗肿瘤的一种免疫治疗策略，并且在治疗血液肿瘤方面取得了良好的效果，但其在实体肿瘤的治疗方面的研究过程却进展十分缓慢。本文就CAR-T疗法在肝细胞癌所分泌的GPC3、CD133的抗原蛋白，神经母细胞瘤所分泌的CD2、GD2的抗原蛋白，非小细胞肺癌所分泌的EaphA2、MU-C1、PSCA的抗原蛋白以及恶性胶质瘤所分泌的IL13Rα2，、EGFRIII的抗原蛋白的近期所进行的最新的研究进行了综述。
关键词：CAR-T细胞疗法;肝细胞癌 ;神经母细胞瘤;胶质瘤;小细胞肺癌;研究进展综述
恶性肿瘤是目前危害世界人民的健康安全的一大难题。恶性肿瘤拥有能自行产生生长信号分子进行无限的自我复制，浸润性生长等特性。因此，彻底地治疗恶性肿瘤现如今已成为了医学界的一大难题。正因为恶性肿瘤的种种特性导致市面上的能特效的针对肿瘤细胞的药物数量极少，同时由于生产和研发成本较高，大多数药物的治疗费用老百姓难以承担，这也是目前恶性肿瘤在农村和城镇能有如此高的致死率的原因之一。根据近几年的卫生和计划生育统计年鉴所调研的数据显示，城镇和乡村人口因肿瘤而死亡的人口数目已达到总死亡人数的26.06%，仅次于循环系统疾病的死亡率，是影响我国人民的生命健康安全的第二大“敌人”。而在这其中，肝癌、肺癌和胃癌这几种实体肿瘤的致死率在恶性肿瘤中排行最高，分别为22.70%、47.84%和18.78%[2]。
本文所介绍的CAR-T（Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherap）免疫疗法是目前市面上最热门的针对肿瘤的免疫治疗法之一。目前，CAR-T细胞疗法在针对血液肿瘤的治疗中取得了良好的进展，但其针对实体肿瘤的研究进展十分得缓慢，导致这一现状的最主要的原因在于，血液肿瘤分泌的特异性抗原在身体的其他部位很少表达，例如B细胞费霍奇金淋巴瘤（Hodgkin"s lymphoma，HL）表达的CD20，多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）表达的CD138等等，但是类似于血液肿瘤这种特异性表达的抗原在实体肿瘤中却十分的少见，这是CAR-T细胞疗法应用于血液肿瘤具有良好的成效的原因。
因此，本研究的主要目的便是对CAR-T细胞疗法在不同实体肿瘤中的研究的最新进展进行综述。
一、CAR-T细胞疗法的分子基础和发展历程
CAR分子的概念最早是于1989年由Gross提出的。其主要由T细胞受体（T cell receptor，TCR）的胞内信号区，跨膜区以和胞外抗原结合区组成，而这个胞外区具有抗体单链可变区片段功能。[2]这一技术的关键在于使转载了CAR分子的T细胞能特异性的地识别并結合肿瘤相关抗原，例如肾细胞癌分泌的CAIX，肺癌和卵巢癌分泌的Lewis Y以及在黑色素瘤、成细胞纤维瘤、骨肉瘤、小细胞肺癌、软组织肉瘤等肿瘤中高度表达的神经节苷脂2（diasialoganglioside，GD2）等等，以使T细胞能在监测到带有特异性靶点抗原的肿瘤细胞时活化产生具有杀伤力的细胞毒性因子，以此来实现靶向性地消灭目标的肿瘤细胞并能实现含有CAR分子的T细胞的自我增殖，从而在人体内能长时间的存在并杀死目的肿瘤细胞。
一代的CAR-T细胞由于缺少共刺激分子，无法有效地实现CAR-T细胞在体内的持续的增殖，而二代的CAR-T细胞增加了共刺激分子，例如CD28，4-1BB，OX40等等，使CAR-T细胞的抗肿瘤活性得到了显著的提高，在三代的CAR-T细胞里，研究人员又增加了一个共刺激分子的信号传导结构，其细胞活性以及杀伤力均优于二代，同时，最新的一代CAR-T细胞，也就是第四代CAR-T细胞，研究人员通过联合细胞因子或共刺激分子的配体改善免疫微环境，从而进一步增强其活性与杀伤力。[3]
目前医学上对CAR-T细胞临床应用的主要操作方法为先将含有CAR分子的载体转染进入T细胞中，再将改造后的T细胞进行体外的增殖，最后将增殖后的含有CAR分子的T细胞在输入已经过预处理的患者体内，此过程称为重新引导T细胞攻击肿瘤细胞。[4]目前在市面上经过美国食品药品监督管理局审批通过并已上市的CAR-T细胞疗法药物主要有两个，分别为Kymriah和Yescarta。
CAR-T细胞疗法在针对血液肿瘤的治疗中取得了良好的进展，但其针对实体肿瘤的研究进展十分的缓慢。目前，主要在肝细胞癌、神经母细胞瘤、胶质瘤、小细胞肺癌等方面取得相关进展。
二、CAR-T细胞疗法在肝细胞癌中的研究进展
根据2016年的中国卫生和计划生育统计年鉴统计，肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是首要的导致城镇居民死亡的癌症，其发病和致死的人群主要集中在25岁以上的成年人群。引起肝癌的主要外部因素为感染肝炎病毒，而其中乙型肝炎又是其中最为常见的一种肝炎病毒（HBV）。根据不完全统计，在我国患有乙型肝炎的人数约有1.2亿人之多。而在内部因素中，嗜酒与长期进食霉变食物是引起肝癌的重要因素。在此前，治疗肝癌的主要途径通过化疗，手术切除，以及肝移植等综合性治疗。同时，目前市面上主流的口服的多靶向性肿瘤治疗药物索拉非尼（Sorafenib）只能将患者的生存时间延长2～3个月。而本文所介绍的CAR-T免疫疗法则是通过诱导自身的免疫细胞来特异性杀死癌变的细胞来进行肝癌的治疗，并能够有效的规避之前的综合性疗法以及药物治疗所带来的部分副反应。目前CAR-T免疫疗法针对HCC所适用的特异性抗原主要有：磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3），CD133。
吴斯玮等[5]运用了GPC3作为特异性抗原所构建的CAR-T细胞经过实验证明在GPC3-CAR-T细胞与阳性Huh-7细胞进行接触时会有大量的LDH释放，表明GPC3-CAR-T对其有杀伤作用，且其效靶比为4：1，能很好的针对HCC进行治疗。
